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PerfinityiDP采用優(yōu)化的專用胰蛋白酶固定化色譜柱，與以往的手工操作酶切處理相比，可大幅縮短消解時(shí)間。從酶切、脫鹽到酶解肽段的HPLC分析的過程實(shí)現(xiàn)在線化，可以完全自動(dòng)處理，不但縮短了前處理時(shí)間，還實(shí)現(xiàn)了高可靠性的前處理以及分析。另外，專用軟件支持一系列過程的方法制作，因此，分析者無需進(jìn)行復(fù)雜設(shè)置便可使用本系統(tǒng)。本系統(tǒng)是適于蛋白制劑、抗體藥的肽繪圖、生物標(biāo)記的有效性驗(yàn)證等廣泛用途的蛋白質(zhì)分析新平臺(tái)。
本系統(tǒng)由各HPLC單元與PerfinityiDP啟動(dòng)組件以及FCV-36AH超高壓2位10通流路切換閥構(gòu)成。Perfinity啟動(dòng)組件包括專用控制軟件與為構(gòu)成系統(tǒng)所需的配管部件。
*iDP為integratedDigestionPlatform的簡(jiǎn)稱。
*PerfinityiDP為PerfinityBiosciences,Inc在美國(guó)的注冊(cè)商標(biāo)。
PerfinityiDP系統(tǒng)具有以下特長(zhǎng)：
1)最快1分鐘完成蛋白質(zhì)的在線胰蛋白酶消解
PerfinityiDP采用高效率的胰蛋白酶固定化色譜柱，對(duì)樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行在線酶切。通過使用已最優(yōu)化的專用胰蛋白酶消解緩沖液，提高了消解效率，實(shí)現(xiàn)了最快1分鐘完成的在線酶切。本色譜柱可以重復(fù)使用，因此可以進(jìn)行連續(xù)的多樣品自動(dòng)分析。PerfinityiDP可以同時(shí)進(jìn)行從胰蛋白酶消解到基于脫鹽色譜柱的濃縮過程與從自脫鹽色譜柱洗脫到基于HPLC進(jìn)行分析的過程，提高了分析通量。為此，可以實(shí)現(xiàn)日分析蛋白質(zhì)樣品200個(gè)以上。
2)專用軟件支持制作從酶切到分析的方法
在從胰蛋白酶消解、脫鹽直到HPLC分析的一系列過程中，專用的PerfinityiDP軟件支持方法選擇和制作。只需輸入酶切時(shí)間、分析色譜柱尺寸、梯度時(shí)間等最小限度的項(xiàng)目便可自動(dòng)最優(yōu)化分析所需的各種參數(shù)，因此分析者無需進(jìn)行復(fù)雜的參數(shù)設(shè)置操作。使用本軟件還可以簡(jiǎn)便地制作用于自動(dòng)分析的分析計(jì)劃。分析后，從本軟件訪問LabSolutions軟件，可方便地進(jìn)行分析結(jié)果的閱覽與解析。
3)在線自動(dòng)化保證卓越的分析可靠性
PerfinityiDP系統(tǒng)不僅將從酶切到肽段分析的一系列過程在線自動(dòng)化，通過在檢測(cè)部分追加LC/MS，還可實(shí)現(xiàn)直到質(zhì)譜分析的一系列流程的自動(dòng)化。與以往的手動(dòng)處理相比，可以統(tǒng)一控制酶反應(yīng)、濃縮?脫鹽等處理，降低了人為誤差，提高了分析精度。另外，采用在抑制交叉污染方面獲得用戶高度肯定的HPLC硬件以及對(duì)分析方法進(jìn)行最優(yōu)化，實(shí)現(xiàn)了極低的交叉污染，包括將LC/MS作為檢測(cè)器使用的場(chǎng)合在內(nèi)，提供了高可靠性的數(shù)據(jù)獲取環(huán)境。
